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原載自：www.r4leiq.cn[行情動態] 2025-01-13 瀏覽次數：266

　　在細胞生物學研究中，細胞株的保存與復蘇是實驗成功的關鍵步驟之一。二甲基亞砜（DMSO）作為一種常用的冷凍保護劑，在細胞凍存過程中發揮著重要作用。然而，當從商業供應商處進行細胞株購買時，這些細胞通常被儲存在含有DMSO的冷凍介質中。那么在開始培養之前，是否有必要通過離心來去除DMSO呢？

　　一、DMSO的作用與潛在影響

　　DMSO能夠降低冰點，減少細胞內冰晶形成，從而保護細胞免受冷凍傷害。但是，高濃度的DMSO對某些類型的細胞可能具有毒性作用，尤其是在復蘇后的初期階段。此外，DMSO也可能干擾后續實驗的結果，比如影響藥物篩選測試或基因表達分析等。

　　二、何時考慮移除DMSO？

　　1.特定類型的細胞：對于一些特別敏感的細胞系，如干細胞或原代細胞，建議在復蘇后盡快移除DMSO。

　　2.長期培養計劃：如果計劃將細胞長時間維持在培養狀態而不立即使用，則應盡可能早地去除DMSO，以減少其潛在的負面影響。

　　3.后續實驗需求：根據即將進行的實驗類型決定是否需要移除DMSO。如在進行流式細胞術或其他需要高度純凈細胞懸液的技術前，最好先清除掉殘留的DMSO。

　　三、如何安全有效地移除DMSO？

　　1.溫和離心：將含有細胞的冷凍管置于37℃水浴中快速解凍，然后轉移到含有新鮮培養基的離心管中，輕輕混勻后以低速（約200-300 g）離心5分鐘。

　　2.洗滌步驟：棄去上清液，加入預熱至室溫的PBS緩沖液重懸沉淀物，再次離心清洗一次。

　　3.轉移至新容器：最后一次離心后，用適量全培養基重新懸浮細胞，并轉移到預先準備好的培養瓶或孔板中繼續培養。

　　四、注意事項

　　1.整個過程中動作要輕柔，避免劇烈震蕩導致細胞損傷。

　　2.確保所有操作都在無菌條件下完成，以防污染。

　　3.根據具體情況調整離心速度和時間，不同種類的細胞對機械應力的耐受程度不同。

　　雖然不是所有情況下都必須去除DMSO，但考慮到其可能帶來的不利影響，特別是對于那些對環境變化較為敏感或者用于特定目的的細胞株來說，采取適當的措施來減少甚至消除DMSO的存在是非常值得推薦的。通過上述方法，我們可以更加靈活地控制實驗條件，提高研究效率和準確性。